Foram utilizados quinze meios bifásicos diferentes para cultivar o parasita promastigota de Leishmania donovani e comparados com o meio NNN comum, a fim de verificar se um meio de ágar com leite de vaca pode proporcionar um bom cultivo do parasita, tal como o meio comum, sendo o leite uma fonte simples, barata e boa de proteínas, hidratos de carbono, lípidos e cálcio. No entanto, o leite não pode substituir o sangue de coelho como fase sólida, que proporcionou a maior contagem de parasitas quando utilizado. Além disso, a utilização de 10% de urina humana como fase líquida pode aumentar a taxa de crescimento do parasita até oito vezes, o que reduziu o tempo necessário para cultivar o parasita no meio NNN comum. Assim, a utilização de um meio NNN modificado BHU (meio que utilizou sangue de coelho como fase sólida e 10% de urina humana como fase líquida) em laboratório pode proporcionar um tempo de cultivo mais curto para o parasita Leishmania.